T2細胞,提醒您收到細胞后,在倒置鏡下(*好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,低速離心,打開細胞培養瓶,吸出培養液(注意不要吸出細胞),換 10ml新鮮培養液后繼續培養。(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:1. 低速離心,棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。2. 按6-8ml/瓶補加
完全培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中(補加完全培養基至8到10ml)。如果沒有特別說明,收到細胞后的**次傳代一般是一傳二。注:1、觀察細胞*好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X或20X物鏡下。2、瓶中運輸培養基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養基,細胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素。3、有些細胞貼壁不牢,如發現貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內。
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