貂肺上皮細胞的培養
1)貂肺上皮細胞培養
1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。
2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。
3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。
4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。
5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊后,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鐘。
6.用吸管輕輕反復吹打,使成細胞懸液。
7.貂肺上皮細胞培養液:通過80目不銹鋼紗網濾過后,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,制成細胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養。
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