大鼠心肌細(xì)胞分離和培養(yǎng)

大鼠心肌細(xì)胞分離和培養(yǎng)
心肌細(xì)胞分離

　　根據(jù)心肌細(xì)胞(大鼠心肌細(xì)胞)和非心肌細(xì)胞貼壁時(shí)間的不同采用2小時(shí)差速貼壁，分別獲得心肌成纖維細(xì)胞和心肌細(xì)胞。心肌細(xì)胞按1*106個(gè)細(xì)胞/ml種于50ml培養(yǎng)液中，培養(yǎng)的前2天在心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中加入5-溴脫氧嘧啶核苷0.1mmol/l，以抑制非心肌細(xì)胞增殖，所有培養(yǎng)的心肌細(xì)胞均每2天換液一次。

　　心肌細(xì)胞的無血清培養(yǎng)

　　當(dāng)心肌細(xì)胞(大鼠心肌細(xì)胞)培養(yǎng)24小時(shí)后換無血清培養(yǎng)液（含DMEM培養(yǎng)液，胰島素10?g/ml,鐵蛋白10?g/ml，維生素C100?g/L維生素B121.5µmol/L）繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí),每隔8小時(shí)換液一次,盡量保持各添加成分濃度不變,*后收集細(xì)胞,進(jìn)行測定。

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