人黑色素瘤細胞的鑒定方法
對體外培養的黑色素細胞(melanocyte,MC)的鑒定方法,大致有以下幾種。
Masson-Fontana氨銀法
(人黑色素瘤細胞)主要用于鑒定黑色素顆粒和嗜銀顆粒。黑色素是一種非脂溶性、非血色素性的色素顆粒,呈黑褐色,存在于頭發、皮膚、視網膜、虹膜及**神經系統的某些部分。嗜銀顆粒分布在類癌組織。染色后嗜銀顆粒和黑色素均呈黑色,細胞核呈粉紅色,細胞漿呈淡紅色。
Dopa染色法
黑色素(人黑色素瘤細胞)的合成是以酪氨酸為底物,在酪氨酸酶的作用下,經過羥化變成多巴,進而氧化成多巴醌,進一步變成黑色素。MC中存在特異性的酪氨酸酶,細胞培養時加入外源性**多巴,會在酪氨酸酶的作用下合成較多的色素顆粒使細胞在鏡下呈現黑色。
電鏡直接觀察特征性細胞結構黑素小體
電鏡下觀察MC內無張力細絲和橋粒,可見有特征性的黑素小體(melano-some),為含酪氨酸酶的細胞器。在細胞核旁I、II期的黑素小體多見,在胞漿周邊已成熟的III、IV期的黑素小體多見,在伸出的樹突里可見成熟的IV期黑素小體排列在樹突的兩側,輸送至樹突的頂端。除了黑素小體之外,MC胞漿內可見豐富的線粒體及豐富的內質網和核糖體等結構。
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