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大鼠肺泡上皮細胞內皮細胞培養

大鼠肺泡上皮細胞內皮細胞培養
  1.(大鼠肺泡上皮細胞)取產后的新鮮臍帶。如不立即培養可以保存于4℃中,但不宜超過12小時。無菌剪取長10~15厘米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管,亦可用于培養。
  2.先用三通注射器吸溫PBS液注入臍帶的靜脈中,洗除殘血,注入口處宜用線繩結扎,以防液體返流。
  3.用血管鉗夾緊臍帶一端,從另端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為0.1%的膠原酶,待末端出現液體后結扎之,令充滿血管,注入口亦應結扎,以防液體返流,消化3~10分鐘。
  4.吸出含有內皮細胞的消化液,注入離心管中,為獲取更多細胞,可再注入溫PBS沖洗2~3次徹底干凈殘余細胞,一并注入離心管中離心。
  5.吸除上清,加1640培養液,制成(大鼠肺泡上皮細胞)細胞懸液,接種入瓶皿中培養,順利時2~3天內細胞即可長成單層。

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