豬ES細胞(小鼠胚胎細胞)介紹
Piedrahita J A等采用STO、(小鼠胚胎細胞)豬成纖維細胞和豬子宮上皮細胞作為飼養層,以DMEM為基礎培養液,從豬囊胚ICM分離ES細胞,發現豬囊胚ICM在STO或PMEF飼養層上可以附著增殖,而在豬胎兒成纖維細胞飼養層上雖可附著但增殖甚微,傳不過4代即發生死亡。Evans等將6天~7天豬囊胚直接培養于STO飼養層上,挑出ICM細胞經增殖傳代培養建立了豬ES細胞系。Strojek R M等認為分離豬ES細胞的*適胚胎為第10天囊胚。研究表明,6日齡~7日齡胚胎在培養過程中極易發生死亡,ICM克隆獲得率極低,而第10天的胚胎容易培養,ICM克隆獲得率較高,但(小鼠胚胎細胞)細胞易于分化。Vasil’ev I M等研究了胚胎發育階段、培養基種類、飼養層細胞等影響豬ES細胞分離的因素,結果表明不同發育階段的附植前囊胚是影響豬ES細胞分離的限制性因素。Wheeler M B等報道豬ES細胞能形成正常的嵌合體和包含三胚層分化物的囊狀胚體,在維甲酸和DMSO的作用下,豬ES細胞能分化形成上皮細胞、肌肉細胞、脂肪細胞、成纖維細胞等,Miyoshi等從體外授精囊胚分離得到豬ES細胞,并以類ES細胞為核供體,獲得了核移植囊胚。國內關于豬ES細胞分離克隆的研究相對較少,李松等分離得到豬ES細胞并傳至第2代,在此基礎上,徐軍等將豬ES細胞傳至3代,馮秀亮等將豬ES細胞傳至5代,馮書堂等也分離得到豬ES細胞,同時對所分離的細胞進行了初步檢測和鑒定,證明其具有多能性。
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