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糖基化多肽方法
糖基化多肽方法
糖基化(糖基化多肽)是在酶的控制下,蛋白質(zhì)或脂質(zhì)附加上糖類的過程,起始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),結(jié)束于高爾基體。在糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基形成糖苷鍵。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是對(duì)蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)功能作用。
方法
活細(xì)胞中去糖基化的方法:
1,(糖基化多肽)衣霉素在體內(nèi)阻斷N-連糖;?
2,將內(nèi)切神經(jīng)氨酸酶注入發(fā)育中的視網(wǎng)膜提示了多唾液酸的特異性作用--將高純度酶注入細(xì)胞內(nèi)+恰當(dāng)?shù)膶?duì)照;
3,將糖基修飾酶的cDNA在活細(xì)胞或動(dòng)物中表達(dá);?
4,在培養(yǎng)環(huán)境中加入凝集素或抗體把特異的聚糖封閉掉。
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