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BioSafety Level	II
Organism	E14.5 Rat Embryo
Source Organ	Adrenal Glands
Growth Properties	Adherent
Morphology	Round
Recommended Seeding Density	Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions.
Applications	For Research Use Only
Immortalization Method	Serial passaging and transduction with recombinant lentiviruses carrying v-myc oncogene
Description	The Immortalized Rat Sympathoadrenal Progenitor Cells (MAH-A3) are derived from HNK-1+ cell population isolated from embryonic rats and that are immortalized using the v-myc oncogene. The cells exhibit morphology resembling the primary cells, and expresses progenitor-specific markers (HNK-1, TH, SCG10, and NF68) and surface antigens such as L1, N-CAM, and Thy-1. MAH-A3 cells are undifferentiated precursors that do not express NGF receptors; however but when cultured in the presence of basic fibroblast growth factor (bFGF abm Z101455), the cells become NGFR-positive post-mitotic sympathetic neurons. MAH-A3 cells are research tools recommended to study the sympathetic development mechanisms.
Procedure Overview
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Propagation	Grow cells in T25 poly-D-lysine and laminin-coated flasks with the following conditions. The base medium for this cell line is L15-CO2 medium (Lonza; 12-669E). To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999) to final concentration of 10%, 50 μM dexamethasone, and Penicillin/Streptomycin (G255). Temperature: 37.0°C. To differentiate cells: The base medium for this cell line is L15-CO2 medium. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999) to final concentration of 10%, 10 ng/ml bFGF(Z101455), and Penicillin/Streptomycin (G255). Note: FGF will increase cell proliferation and neurite outgrowth, but the removal of dexamethasone causes the cells to die more rapidly. It is recommended to grow cells in the presence of dexamethasone before culturing cells to cause differentiation.
Quality Control	1) Northern blot to confirm v-myc-containing pro-viral RNA transcripts and cell markers; 2) Southern blot to analyze pro-viral transcript integration; 3) Immunofluorescence staining of sympathoadrenal markers.
Disclaimer
聯(lián)系方式	何經(jīng)理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898      400-8702-898，                                                  E-mail：info@qingbio.com      http://www.huangyuansheng.cn      QQ:514713116

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