出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱:	ATCC CRL-1780~RF/6A~猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜（皮下）細(xì)胞
存儲人:	F Hu
種屬來源:	恒河猴
組織來源:	脈絡(luò)膜；視網(wǎng)膜；內(nèi)皮細(xì)胞
疾病特征:	正常
細(xì)胞形態(tài):	上皮細(xì)胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養(yǎng)基:	RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號:	CRL-1780
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
應(yīng)用:	晚代細(xì)胞已經(jīng)作為飼養(yǎng)層來提高附著，葡萄膜黑色素細(xì)胞的培養(yǎng)和維護(hù)。
聯(lián)系方法:	何經(jīng)理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898     400-8702-898    E-mail：info@qingbio.com 網(wǎng)址：http://www.huangyuansheng.cn     QQ:514713116

ATCC CRL-1780~RF/6A~猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜（皮下）細(xì)胞特點和簡介

 這個細(xì)胞株在早期自發(fā)轉(zhuǎn)化并已傳代540次以上。 電鏡下觀察到Weibel-Palade顆粒。 高代次的細(xì)胞用作滋養(yǎng)層以增強(qiáng)貼壁，轉(zhuǎn)接能力和供養(yǎng)眼色素層黑素細(xì)胞。 在本庫通過支原體檢測。

ATCC CRL-1780~RF/6A~猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜（皮下）細(xì)胞接受后處理

1) 收到ATCC CRL-1780(RF/6A)細(xì)胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到ATCC CRL-1780(RF/6A)細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

ATCC CRL-1780~RF/6A~猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜（皮下）細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL ATCC CRL-1780(RF/6A)細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。        

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-1780~RF/6A~猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜（皮下）細(xì)胞培養(yǎng)注意事項

1.收到ATCC CRL-1780(RF/6A)細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3.用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4.靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì)胞匯合度  80%左右時正常傳代。
5.請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6.建議客戶收到ATCC CRL-1780(RF/6A)細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 ******* 技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。

  合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業(yè)代理商，專業(yè)經(jīng)營ATCC菌種、ATCC原代細(xì)胞、培養(yǎng)基、抗體、生物試劑、耗材等，合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務(wù)，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)專業(yè)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務(wù)！

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