出品公司:	ATCC
細(xì)胞名稱:	ATCC CCL-127~IMR-32~人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
存儲(chǔ)人:	WW Nichols
種屬來源:	人
組織來源:	大腦
疾病特征:	神經(jīng)母細(xì)胞瘤
細(xì)胞形態(tài):	神經(jīng)母細(xì)胞，成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:	貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:	MEM培養(yǎng)基(MEM，GIBCO，貨號(hào)41500034)，90%；FBS，10%。
產(chǎn)品目錄號(hào):	CCL-127
生長(zhǎng)條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè):	陰性
**等級(jí):	1
應(yīng)用:	該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
STR:	Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 9 D16S539: 8 D5S818: 11,12 D7S820: 9,10 THO1: 7,9.3 TPOX: 11 vWA: 15
同工酶:	G6PD, B
聯(lián)系方法:	何經(jīng)理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898 E-mail：info@qingbio.com 網(wǎng)址：http://www.huangyuansheng.cn QQ:514713116

ATCC CCL-127~IMR-32~人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

IMR-32細(xì)胞是1967年四月 W.W. Nichols, J. Lee and S. Dwight從一位13個(gè)月大的男嬰下腹部腫瘤中分離建株。診斷認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞瘤，并有少部分區(qū)域的器質(zhì)性分化。包括兩種類型的細(xì)胞。主要的是小的神經(jīng)母細(xì)胞樣的細(xì)胞。另一種是大的透明成纖維細(xì)胞。細(xì)胞提交到ATCC時(shí)已經(jīng)傳到第36代。已經(jīng)證明細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)到80代以上。在本庫通過支原體檢測(cè)。在本庫通過STR檢測(cè)。

ATCC CCL-127~IMR-32~人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞接受后處理

1) 收到ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。

5) 接到ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián) 系。

ATCC CCL-127~IMR-32~人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mLATCC CCL-127(IMR-32) 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CCL-127(IMR-32)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān) 。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜?費(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì)胞匯合度80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到ATCC CCL-127(IMR-32)細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 ******* 技術(shù) 部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。

合肥星肽生物科技有限公司作為美國(guó)ATCC專業(yè)代理商，專業(yè)經(jīng)營(yíng)ATCC菌種、ATCC原代細(xì)胞、培養(yǎng)基、抗體、生物試劑、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務(wù)，對(duì)購(gòu)買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)專業(yè)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在我公司獲得*上等服務(wù)！