ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
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產品名稱: ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
產品型號: CRL-2594
產品展商: ATCC
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簡單介紹
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
ATCC細胞庫 MC3T3-E1
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14基本信息
訂貨專線：4008-702-898
ATCC
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14
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RT Franceschi
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小鼠
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顱頂骨
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成纖維細胞樣
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貼壁生長
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MEMα+培養基(GIBCO,貨號11900024)，90%；FBS，10%。
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CRL-2594
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氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
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1：2至1：6，每周2次。
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90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存
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陰性
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1
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該細胞是研究體外成骨細胞分化，特別是細胞外基質信號的良好模型。他們的行為類似于原發性顱骨成骨細胞。
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何經理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898 E-mail：info@qingbio.com
網址：http://www.huangyuansheng.cn QQ:514713116
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14特點和簡介
從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。 從含抗壞血酸培養基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4（ATCC CRL-2593）和MC3T3亞克隆14（ATCC CRL-2594）在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化。 它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質（ECM）。 MC3T3亞克隆24（ATCC CRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現出很差的成骨細胞分化。 不形成ECM， 可以作為亞克隆4和14的陰性對照。 礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA，及唾液酸糖蛋白(BSP)，骨鈣素(OCN)，和甲狀旁腺激素/甲狀旁腺激素相關蛋白受體的mRNA。 高或者低的分化潛能的亞克隆在培養中生產出相似數量的膠原質，表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細胞相關轉錄因子。 植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨，低分化細胞只是產生纖維組織。 這些細胞系是研究體外成骨細胞分化的好模型，尤其是ECM信號。 它們和原代培養顱頂成骨細胞的行為類似。 在本庫通過支原體檢測。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14接受后處理
1) 收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養 基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯 系。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養 過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶 中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中 或者瓶中。
3）細胞凍存：待ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞， 根據細胞數量加入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14培養注意事項
1. 收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、 所 需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶 自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細 胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼 壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮 培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯系，信息確認后我們為 您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細胞匯合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 ******* 技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商，專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位，都有相關專業人士進行維護,確保您在我公司獲得*上等服務！
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