出品公司:	ATCC
細胞名稱:	ATCC CRL-2099~KU812~人外周血嗜堿性白血病細胞
存儲人:	K Kishi
種屬來源:	人
組織來源:	外周血
疾病特征:	慢性髓性白血病
細胞形態:	骨髓母細胞
生長特性:	懸浮生長
培養基:	IMDM培養基(GIBCO,貨號12200036)，90%；FBS，10%。
產品目錄號:	CRL-2099
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
聯系方法:	何經理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898     400-8702-898    E-mail：info@qingbio.com 網址：http://www.huangyuansheng.cn     QQ:514713116

ATCC CRL-2099~KU812~人外周血嗜堿性白血病細胞特點和簡介

從一位慢性髓性白血病患者暴發期的外周血建立了KU812細胞株。 這些細胞至少有一個Ph1(費城)染色體。 這株細胞有一些嗜堿性細胞的標記(如Fc 受體，堿性顆粒，生成組胺)，而淋巴標記陰性。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

ATCC CRL-2099~KU812~人外周血嗜堿性白血病細胞接受后處理

1) 收到ATCC CRL-2099(KU812)細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養 基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯 系。

ATCC CRL-2099~KU812~人外周血嗜堿性白血病細胞培養操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養 過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。        

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶 中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落 ，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心4分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中 或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞， 根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CRL-2099~KU812~人外周血嗜堿性白血病細胞培養注意事項

1. 收到ATCC CRL-2099(KU812)細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、 所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶 自行承擔。
3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼 壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮 培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為 您再免費寄送一次。
4.   靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待ATCC CRL-2099(KU812)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6.   建議客戶收到ATCC CRL-2099(KU812)細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 ******* 技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系 ，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。

  合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商，專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位，都有相關專業人士進行維護,確保您在我公司獲得*上等服務！

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