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ATCC CRL-2169~SW 780~人膀胱移行細胞癌
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W McCombs
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人
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膀胱
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移行細胞癌
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上皮細胞樣
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貼壁生長
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L-15培養基(GIBCO,貨號41300039),90%;FBS,10%。
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CRL-2169
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氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃,
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1:2至1:6,每周2次。
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90% 完全培養基+10% DMSO,液氮儲存
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陰性
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1
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何經理,合肥星肽生物科技有限公司,Tel:0551-63802898 400-8702-898 E-mail:info@qingbio.com
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ATCC CRL-2169~SW 780~人膀胱移行細胞癌特點和簡介
1974年A. Leibovitz從**期移行細胞瘤中建立了SW細胞株。 患者接受過術前化療(Thiotepa)。 報道稱此細胞的植板率為41%。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
ATCC CRL-2169~SW 780~人膀胱移行細胞癌接受后處理
1) 收到ATCC CRL-2169(SW 780)細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養 基。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯 系。
ATCC CRL-2169~SW 780~人膀胱移行細胞癌培養操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL ATCC CRL-2169(SW 780)細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養 過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶 中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中 或者瓶中。
3)細胞凍存:待ATCC CRL-2169(SW 780)細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞, 根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ATCC CRL-2169~SW 780~人膀胱移行細胞癌培養注意事項
1. 收到ATCC CRL-2169(SW 780)細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述 現 象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、 所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶 自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼 壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實ATCC CRL-2169(SW 780)細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮 培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為 您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培 養,待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄ATCC CRL-2169(SW 780)細胞狀態,便于和 ******* 技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系 ,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商,專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等,我公司和ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務,對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位,都有相關專業人士進行維護,確保您在我公司獲得*上等服務!
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