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ATCC細胞 CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞基本信息
訂貨專線：4008-702-898
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出品公司:
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ATCC
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細胞名稱:
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ATCC CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞
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存儲人:
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RJ Helmke
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種屬來源:
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大鼠
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組織來源:
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肺
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疾病特征:
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巨噬細胞；肺泡
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細胞形態:
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巨噬細胞
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生長特性:
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半貼壁生長
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培養基:
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F12K培養基(MEM，SIGMA，貨號N3520)，80%；FBS，20%。
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產品目錄號:
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CRL-2192
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生長條件:
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氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
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傳代方法:
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1：2至1：6，每周2次。
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凍存條件:
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90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存
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支原體檢測:
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陰性
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**等級:
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1
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應用:
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可用于體外研究巨噬細胞相關的活動源。
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聯系方法:
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何經理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898 E-mail：info@qingbio.com
網址：http://www.huangyuansheng.cn QQ:514713116
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ATCC細胞 CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞特點和簡介
NR8383 (正常大鼠，1983年8月3日)來源于肺灌洗時的正常大鼠肺泡巨噬細胞。 細胞在gerbil肺細胞連續培養液存在下培養了大約8-9個月。 隨后，不再需要外源生長因子。 通過有限稀釋法從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞，并三次用軟瓊脂亞克隆。 細胞表現出巨噬細胞的特性，吞噬酵母多糖和銅綠，非特異性脂酶活性，Fc受體，氧化降解；分泌IL-1, TNF beta和IL-6，可重復地響應外源生長因子。 NR8383細胞響應博萊霉素，分泌TGF beta前體。 在博萊霉素刺激下，TGF beta mRNA表達也上升。 細胞對內毒素敏感。 1-10 鈉克/毫升的LPS水平抑制增生達50%。 即使達到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制還是**且在后續過程中可逆的。 NR8383細胞株提供了高響應的肺泡巨噬細胞的均一來源，可以用于體外研究巨響細胞相關活性。 此細胞半懸浮生長。 在本庫通過支原體檢測。
ATCC細胞 CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞接受后處理
1)收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4)如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5)接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
ATCC細胞 CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL ATCC CRL-2192(NR8383)細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果ATCC CRL-2192(NR8383)細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ATCC細胞 CRL-2192~NR8383~大鼠肺泡巨噬細胞培養注意事項
1. 收到ATCC CRL-2192(NR8383)細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀ATCC CRL-2192(NR8383)細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置ATCC CRL-2192(NR8383)細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄ATCC CRL-2192(NR8383)細胞狀態，便于和 ******* 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商，專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等，合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位，都有相關專業人士進行維護,確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務！
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