細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代,再培養，傳代培養也是一種將細胞保存下去的方法，同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程，懸浮型細胞直接分瓶就可以而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

人外根鞘細胞建立和培養簡介:

創建的4因子轉錄法進行細胞制作，原料為末梢血單核細胞，采樣簡單。如使用新鮮單核細胞，2周后可獲得細胞克隆體(圖1)，4周內便可以制作出初代細胞(圖2)。在培養方面，使用無滋養層培養法對細胞進行增殖培養，可在每周獲得2-3倍的細胞(圖3，圖4)。在細胞狀態穩定后，進行免疫染色測試，對細胞的未分化狀態進行確定，分別對細胞進行膜染色(圖5)及核染色(圖6)，由此得到高質量的細胞。                        

人外根鞘細胞主要服務:

1)細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)

2)細胞增殖及冷凍保存

3)基礎培養技術實習

4)新藥及實驗儀器上市前評估

人外根鞘細胞培養的過程中，經常見到黑色的顆粒或小黑點，這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?

原因:黑點，大概有細胞本身帶的，環境有的，還有人身上帶進細胞間的,還有就是血清和培養基

1、如果小黑點有增殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理;

2、如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞生長，也不影響實驗的話，則可能

  a、是“黑膠蟲”，黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲，也有人認為是細菌，或是真菌，也有人認為是血清中的蛋白的結晶。“黑膠蟲”可寄生于動物細胞，也可以生存于培養基中，依靠細胞和培養基中的營養為生，并隨人外根鞘細胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細胞競爭性生長，開始時對細胞并沒有什么影響，但當黑膠蟲的數量多到一定程度的時候， 細胞生長就會受到影響直至死亡，嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前(這個至少是10年以前)，很多實驗室在養細胞時用國產血清，那時的血清可能質量不過關，有所謂的“黑膠蟲”，但是也沒有明確的鑒定。但是現在的血清，即使國產的，產品里這種現象就少見了。

 b、是細胞碎片，或血清里德沉淀析出，在做布朗運動。

 c、是核糖體，也可能是雜質

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人外根鞘細胞應用舉例

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