細胞簡介：

大鼠膀胱成纖維細胞分離自膀胱組織，膀胱是—個儲尿器官，在哺乳類動物， 它是由平滑肌組成的—個囊形結構， 位于

骨盆內， 其后端開口與尿道相通。膀胱與尿追的交界處有括約肌， 可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成， 由內向

外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構成， 稱為逼尿肌， 逼尿肌收縮， 可使膀胱內壓升高， 壓迫尿液由尿道排

出。在膀胱與尿追交界處有較厚的環形肌， 形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口，防止尿液自膀胱漏出。膀

胱壁分為三層． 即漿膜層（蜂窩脂肪組織） 、肌肉層（ 逼尿肌、膀胱三角區肌） 和黏膜層（ 極薄的—層移行上皮組織）。

成纖維細胞( F i brob l ast }是疏松結締組織的主要細胞成分， 由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大， 輪廓

清楚， 多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構， 其細胞核呈規則的卵圓形， 核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛， 細

胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在—定條件下， 它可以實現跟纖維細胞的互相轉化，成纖維細胞對不同

程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形、折光性良好， 懸浮于培

養基中。30m i n細胞貼壁， 其中部分開始俾出偽足， 表現為小的突起， 6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形， 胞核清晰，

分布較均勻， 散在生長， 不聚集成團，細胞生長迅速， 5-7天即呈融合狀態， 細胞排列緊密， 有的交叉重疊生長， 平坦、胞

體較大，細胞質透明， 細胞核較大， 呈橢圓形， 顏色淡。細胞融合， 并彼此連接成網狀， 細胞呈突起的紡錘形或星形的扁

平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是—種具有多功能的促有絲分裂原， 研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近

年來， 堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視。

1) 收到非紅系有核細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。

大鼠膀胱成纖維細胞培養操作

1）復蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。 
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

大鼠膀胱成纖維細胞培養注意事項

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。

  合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商，專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等，合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位，都有相關專業人士進行維護,確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務！

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大鼠膀胱成纖維細胞說明書pdf版和相關資料下載

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