培養(yǎng)基信息
我們推薦使用合肥星肽生物科技有限公司大鼠骨骼肌成纖維細胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌成纖維細胞的培養(yǎng)基
大鼠骨骼肌成纖維細胞接受后處理
1) 收到非紅系有核細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
大鼠骨骼肌成纖維細胞培養(yǎng)操作
1)復蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠骨骼肌成纖維細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業(yè)代理商,專業(yè)經(jīng)營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養(yǎng)基、抗體、生物試劑、耗材等,合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務(wù),對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位,都有相關(guān)專業(yè)人士進行維護,確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務(wù)!
公司網(wǎng)址:http://www.huangyuansheng.cn
大鼠骨骼肌成纖維細胞說明書pdf版和相關(guān)資料下載
選擇合肥星肽生物科技有限公司的理由
生產(chǎn)實力雄厚
合肥星肽生物科技有限公司擁有近2000平方米獨立研發(fā)中心以及無菌實驗室4條完善的多肽生產(chǎn)線,單月可交貨3000條多肽精品,生產(chǎn)研發(fā)速度快,可快速相應(yīng)您的需求。
技術(shù)設(shè)備先進
合肥星肽生物科技有限公司實驗室配備了waters LC-MA/MS、waters uplc,waters全自動純化儀、島津LCMS、全自動凍干系統(tǒng)、紫外分光光度計等專用精密儀器,為您提供高效專業(yè)的技術(shù)服務(wù)。
客戶服務(wù)完善
合肥星肽生物科技有限公司廣大客戶提供專業(yè)的前沿產(chǎn)品、合理的價格、便捷的物流服務(wù),幫助客戶縮短科研周期、節(jié)省試驗成本,使客戶的科學研究具有持續(xù)性。
關(guān)于合肥星肽生物科技有限公司
合肥星肽生物科技有限公司是一家致力于生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),公司地址位于科教名城———合肥市。公司主營多肽合成、多肽定制、多肽純化等多肽制備多肽技術(shù)服務(wù)。在合肥市與中科院的關(guān)懷下,2021年初合肥市高新區(qū)與中科院分別與合肥星肽生物科技有限公司簽訂了戰(zhàn)略投資協(xié)議。
公司位于合肥市高新區(qū)安徽中科資城創(chuàng)業(yè)孵化器A區(qū),擁有2000平方米獨立研發(fā)中心以及無菌實驗室,四條完善的多肽生產(chǎn)線,配備了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自動純化儀、島津LCMS、全自動凍干系統(tǒng)、紫外分光光度計等專用精密儀器保障合肥星肽生物科技有限公司月產(chǎn)3000條精品多肽的生產(chǎn)能力,這些得以讓我們可以為客戶快速準確的提供各種高質(zhì)量的多肽產(chǎn)品及服務(wù)。
合肥合肥星肽生物科技有限公司始終致力于為您的實驗研究提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,“做您身邊的多肽合成專家”一直是每個合肥星肽生物科技有限公司人的目標與方向,勵志作為多肽合成行業(yè)標準的風向標。公司擁有100余人的專業(yè)團隊,其中博士研究生、碩士研究生10余人。在此基礎(chǔ)上公司配備了一套包含從售前到售后的專業(yè)團隊,力爭做到每個環(huán)節(jié)都“清晰明了”,對每一個問題都“吹毛求疵”,讓您的實驗變得更加簡單,正是憑借這樣的信仰和扎實的多肽合成技術(shù)優(yōu)勢,合肥星肽生物科技有限公司已經(jīng)成為國內(nèi)外高校與眾多生物醫(yī)藥企業(yè)誠信的合作伙伴和堅強的技術(shù)后盾。
公司秉承“專業(yè)鍛造品質(zhì),服務(wù)打造市場”的經(jīng)營理念,為國內(nèi)廣大客戶提供專業(yè)的前沿產(chǎn)品、合理的價格、便捷的物流服務(wù)。 公司自成立以來,一直致力于多肽合成、多肽定制、多肽純化等多肽制備多肽技術(shù)服務(wù)的研究。幫助客戶縮短科研周期、節(jié)省試驗成本,使客戶的科學研究具有持續(xù)性。 實驗室配備一支年輕、專業(yè)、富有創(chuàng)造精神且經(jīng)驗豐富的技術(shù)團隊。
合肥星肽生物科技有限公司目前跟國內(nèi)外企業(yè)有著友好的合作往來。斯坦福大學,牛津大學,北京大學,清華大學,天津大學,浙江大學,中科大,香港理工大學,以及中科院遺傳所,過程所,化學所,生物細胞所,微生物所等,北京軍科院**醫(yī)學研究所,武漢病毒研究所等有穩(wěn)定合作。
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