細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠肝星形細(xì)胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的—個(gè)器官, 并在身體里面起看去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分
泌性蛋白質(zhì)的合成等作用, 肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里*大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右
側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方, 胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中*大的消化腺,為—紅棕色的V
字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的謝要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏
在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所覆蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁, 肝上面則與膈及腹前壁
相接。肝星形細(xì)胞(HSC) 又名肝貯脂細(xì)胞、維生素A貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等,是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)源。
HSC在激活后可進(jìn)—步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為*終靶細(xì)胞。正常情況下,
HSC處于靜止?fàn)顟B(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時(shí), HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍 SC可通
過(guò)增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建, 此過(guò)程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝
臟的Disse間隙內(nèi),是合成分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來(lái)灑,在肝纖維化的發(fā)生中處于*重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟特有的
間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、
糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成—定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過(guò)其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)
節(jié)。此外, 肝星形細(xì)胞能通過(guò)合成肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。
培養(yǎng)基信息
我們推薦使用合肥星肽生物科技有限公司小鼠肝星形細(xì)胞專(zhuān)用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)小鼠肝星形細(xì)胞的培養(yǎng)基
小鼠肝星形細(xì)胞接受后處理
1) 收到非紅系有核細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
小鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)操作
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作為美國(guó)ATCC專(zhuān)業(yè)代理商,專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)ATCC菌種、ATCC原代細(xì)胞、培養(yǎng)基、抗體、生物試劑、耗材等,合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶(hù)提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務(wù),對(duì)購(gòu)買(mǎi)項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位,都有相關(guān)專(zhuān)業(yè)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務(wù)!
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選擇合肥星肽生物科技有限公司的理由
生產(chǎn)實(shí)力雄厚
合肥星肽生物科技有限公司擁有近2000平方米獨(dú)立研發(fā)中心以及無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室4條完善的多肽生產(chǎn)線,單月可交貨3000條多肽精品,生產(chǎn)研發(fā)速度快,可快速相應(yīng)您的需求。
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關(guān)于合肥星肽生物科技有限公司
合肥星肽生物科技有限公司是一家致力于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),公司地址位于科教名城———合肥市。公司主營(yíng)多肽合成、多肽定制、多肽純化等多肽制備多肽技術(shù)服務(wù)。在合肥市與中科院的關(guān)懷下,2021年初合肥市高新區(qū)與中科院分別與合肥星肽生物科技有限公司簽訂了戰(zhàn)略投資協(xié)議。
公司位于合肥市高新區(qū)安徽中科資城創(chuàng)業(yè)孵化器A區(qū),擁有2000平方米獨(dú)立研發(fā)中心以及無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室,四條完善的多肽生產(chǎn)線,配備了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自動(dòng)純化儀、島津LCMS、全自動(dòng)凍干系統(tǒng)、紫外分光光度計(jì)等專(zhuān)用精密儀器保障合肥星肽生物科技有限公司月產(chǎn)3000條精品多肽的生產(chǎn)能力,這些得以讓我們可以為客戶(hù)快速準(zhǔn)確的提供各種高質(zhì)量的多肽產(chǎn)品及服務(wù)。
合肥合肥星肽生物科技有限公司始終致力于為您的實(shí)驗(yàn)研究提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,“做您身邊的多肽合成專(zhuān)家”一直是每個(gè)合肥星肽生物科技有限公司人的目標(biāo)與方向,勵(lì)志作為多肽合成行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的風(fēng)向標(biāo)。公司擁有100余人的專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì),其中博士研究生、碩士研究生10余人。在此基礎(chǔ)上公司配備了一套包含從售前到售后的專(zhuān)業(yè)團(tuán)隊(duì),力爭(zhēng)做到每個(gè)環(huán)節(jié)都“清晰明了”,對(duì)每一個(gè)問(wèn)題都“吹毛求疵”,讓您的實(shí)驗(yàn)變得更加簡(jiǎn)單,正是憑借這樣的信仰和扎實(shí)的多肽合成技術(shù)優(yōu)勢(shì),合肥星肽生物科技有限公司已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外高校與眾多生物醫(yī)藥企業(yè)誠(chéng)信的合作伙伴和堅(jiān)強(qiáng)的技術(shù)后盾。
公司秉承“專(zhuān)業(yè)鍛造品質(zhì),服務(wù)打造市場(chǎng)”的經(jīng)營(yíng)理念,為國(guó)內(nèi)廣大客戶(hù)提供專(zhuān)業(yè)的前沿產(chǎn)品、合理的價(jià)格、便捷的物流服務(wù)。 公司自成立以來(lái),一直致力于多肽合成、多肽定制、多肽純化等多肽制備多肽技術(shù)服務(wù)的研究。幫助客戶(hù)縮短科研周期、節(jié)省試驗(yàn)成本,使客戶(hù)的科學(xué)研究具有持續(xù)性。 實(shí)驗(yàn)室配備一支年輕、專(zhuān)業(yè)、富有創(chuàng)造精神且經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。
合肥星肽生物科技有限公司目前跟國(guó)內(nèi)外企業(yè)有著友好的合作往來(lái)。斯坦福大學(xué),牛津大學(xué),北京大學(xué),清華大學(xué),天津大學(xué),浙江大學(xué),中科大,香港理工大學(xué),以及中科院遺傳所,過(guò)程所,化學(xué)所,生物細(xì)胞所,微生物所等,北京軍科院**醫(yī)學(xué)研究所,武漢病毒研究所等有穩(wěn)定合作。
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