人臍靜脈血管內皮細胞的培養
細胞接種培養
1、細胞接種:
?。?)、包被液:用去離水配制0.5%明膠溶液,過濾除菌。
(2)、培養瓶包被:取2-4個T25培養瓶,每個培養瓶加2-3ml0.5%明膠溶液,搖勻使包被液布滿培養瓶底面,置37℃2小時或放置過夜。
?。?)、人臍靜脈血管內皮細胞接種細胞:接種前吸凈包被液,按2500-5000個細胞/cm接種細胞(1支5×10個細胞可接種2-4個培養瓶),每瓶加培養液3-5ml,搖勻后置37℃5%CO2培養箱內培養24小時,此時細胞已完全貼壁,更換培養液后繼續在37℃5%CO2培養箱內培養。
(4)、人臍靜脈血管內皮細胞擴大培養:一般每周更換培養液2次,至細胞長至覆蓋培養面的70-80%可進行傳代或凍存。
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